去端肽膠原,蜂窩海綿


產品編號 產品名稱 產品規格 產品等級 產品價格
KOU-CSH-10 Atelocollagen?Honeycomb?sponge 100MG
KOU-CSH-96 Atelocollagen?Honeycomb?Disc?96 25PC


3D培養和3D支架組織工程研究的有用工具去端肽膠原,蜂窩海綿

去端肽膠原,蜂窩海綿

Atelocollagen  Honeycomb

背景

  “蜂窩”膠原海綿具有方向統一、均勻的孔(200-400微米),細胞可以穿透并在其中增殖密集地排列。這種結構有利于營養物質到海綿內為細胞做準備供應,并釋放代謝廢物和生化產物。細胞能夠增殖且填充管腔,形成均勻的細胞團。


去端肽膠原,蜂窩海綿

去端肽膠原蜂窩海綿

Atelocollagen Honeycomb Sponge

(KOU-CSH-10) 為2毫米的立方體,應用于3D細胞

培養物和高密度細胞培養基組織工程細胞支架


去端肽膠原,蜂窩海綿

去端肽膠原蜂窩海綿

Honeycomb Disk 96

(KOU-CSH-96)直徑為6毫米圓盤形,

適用于96孔和高通量篩選細胞培養。


去端肽膠原,蜂窩海綿

KOU-CSH-10 : stereoscopic microscope image

立體顯微鏡圖像


去端肽膠原,蜂窩海綿

KOU-CSH-96 : stereoscopic microscope image

立體顯微鏡圖像


去端肽膠原,蜂窩海綿

Electron microscope image of Honeycomb sponge

蜂窩海綿的電子顯微圖像


去端肽膠原,蜂窩海綿

Electron microscope image of mouse fibroblast

cell culture in 'Honeycomb collagen sponge

蜂窩膠原海綿小鼠成纖維細胞培養的電子顯微鏡圖像

去端肽膠原的特點

  去端肽膠原是由蛋白酶溶解的膠原,但是它的物理性質幾乎與天然未加溶的膠原蛋白相同。而去端肽膠原更具有優越的特性。



去端肽膠原,蜂窩海綿

特點與優點

  “蜂窩”膠原海綿由高度純化I型去端肽膠原制備(牛皮來源),并且可以通過膠原酶降解。

◆應用

  3D培養

  組織工程3D支架研究

◆使用實例

實例 1

NG1RGB人成纖維細胞在蜂窩圓盤(KOU-CSH-96)

去端肽膠原,蜂窩海綿

飼養層細胞/孔(×103

附著細胞于蜂窩圓盤96(×103

10

2.2

20

5.3

40

8.6

細胞增殖:如圖所示,在蜂窩圓盤96培養孔中接種。

細胞增殖通過NADH依賴性燃料(WST-8)測定OD值。

細胞附著:圓盤培養如圖所示,培養一天后轉移至新培養孔,并測定細胞數,顯示20%的細胞附著。

實例 2

胚體在蜂窩海綿支架體內移植后的胚體致畸移植

  小鼠腎臟在海綿蜂窩支架移植(EB/+ CSH)胚體移植后12周后,沒有形成畸胎瘤的跡象,而無KOU-CSH-10(ES/-CSH)的所有小鼠胚體培養產生畸胎瘤。組織學上,移植ES /+ CSH與相鄰的主腎組織沒有明顯區別,表明沒有具體的誘導自發分化難以區分。

  方法:板中培養小鼠胚胎干(ES)細胞進行胰蛋白酶處理,通過尼龍網過濾,接種到96孔板(1×10^4細胞/孔),培養5天,形成胚狀體(EB)。當EB與蜂窩海綿(KOU-CSH-10)混合,EB迅速、均勻融入KOU-CSH-10的矩陣中。EB /+ CSH復合物移植到6周齡小鼠的腎筋膜。


去端肽膠原,蜂窩海綿


實例 3

  體內小鼠胚胎干/間質細胞鑲嵌球移植KOU-CSH-10支架后新生毛發。
  

  方法:小鼠ES細胞和小鼠胚胎間充質細胞(MDU1)共培養以產生兩種細胞的鑲嵌球體。鑲嵌球體與KOU-CSH-10去端肽膠原蜂窩海綿混合,在6周齡小鼠的背部肌肉移植。

去端肽膠原,蜂窩海綿

<參考文獻>
1. Suzuki T, et al. Growth inhibition and differentiation of cultured smooth muscle cells depend on cellular crossbridges across the tubular lumen of type I collagen matrix honeycombs. (2009) Microvasc Res. 77(2):143-149.

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去端肽膠原,蜂窩海綿

AteloCell 細胞培養膠原.pdf

AteloCell? 系列常見問題(FAQ)

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去端肽膠原,蜂窩海綿



◆脂肪變性膠原海綿35mm培養皿


Q1:膠原蛋白海綿是否耐熱? 它能承受的最高溫度是多少? 當溫度升高到高于體溫的溫度時,它會降解嗎?
A1:我們沒有測量這種產品的耐熱性。以下信息供您參考,由于液體膠原變性在40°C左右,海綿型膠原可能

A1:不會變性,除非達到更高的溫度。


Q2:這種膠原蛋白的彈性是什么? 它會容易撕裂嗎? 它能承受多少重量? 最重要的是,在處理膠原時,我們

Q2:應該注意哪些?
A2:我們沒有測試這種產品的彈性。然而,它可能抵抗一定水平的負載,因為這種產品是凍干的不溶性膠原蛋

A2:白。


Q3:它是否適合移植,例如皮膚移植用于傷口愈合?
A3:這不適合移植,因為是沒有消除端肽的天然膠原。


Q4:膠原蛋白海綿會溶解嗎? 他們如何溶解? 大概需要多長時間才能使它們完全溶解,特別是移植(如皮膚

Q4:胞)到/入動物模型后? 當膠原溶解時,培養的細胞會發生怎么樣的變化?
A4:本產品由不溶性膠原蛋白制成,因此不易溶解。在體內情況下,它會在MMP中溶解。雖然該產品不適合

A4:移植,但有報道稱該產品用于體內實驗。 根據報告,膠原在8周后從活體中移除。移植膠原被認為將可以

A4:取代移植細胞的胞外基質,直到其消失。


Q5:我們可以用手術刀手動切割膠原片到更小的尺寸嗎? 在切割過程中和切割后會造成膠原片/結構/完整性的

Q5:破壞/扭曲/分散嗎?
A5:你可以切割膠原板,但如果你使用鈍刀,孔結構可能會皺起來。


Q6:細胞會以多大強度/完好地吸附到膠原海綿? 即使在強烈攪拌后細胞能否容易分離?
A6:即使在強烈攪拌后,一旦細胞附著,也不容易分離,除非低粘附性細胞。


Q7:我們如何能夠以最小損傷從膠原海綿中分離細胞?
A7:請使用膠原酶分離膠原。

◆膠原海綿,90*80*5mm


Q1:吸水后變形的膠原海綿的厚度是多少?
A1:它將變得略小于5mm。


Q2:一旦吸收水,海綿將變形,除非進行交聯。 這方面的交聯是什么意思?
A2:考慮通過UV或γ輻射的物理交聯或通過交聯劑的化學交聯。


Q3:膠原海綿是否耐熱? 它能承受的最高溫度是多少? 當溫度升高到高于體溫的溫度時,它會降解嗎?
A3:我們沒有測量這種產品的耐熱性。以下信息供您參考,由于液體膠原變性在40°C左右,海綿型膠原可能不

A3:會變性,除非達到更高的溫度。


Q4:這種膠原蛋白的彈性是什么? 它會容易撕裂嗎? 它能承受多少重量? 最重要的是,在處理膠原時,我們

Q4:應該注意哪些?
A4:我們沒有測試這種產品的彈性。然而,它可能抵抗一定水平的負載,因為這種產品是凍干的不溶性膠原蛋

A4:白。


Q5:它是否適合移植,例如皮膚移植用于傷口愈合?
A5:這不適合移植,因為是沒有消除端肽的天然膠原。


Q6:膠原蛋白海綿會溶解嗎? 他們如何溶解? 大概需要多長時間才能使它們完全溶解,特別是移植(如皮膚

Q6:細胞)到/入動物模型后? 當膠原溶解時,培養的細胞會發生怎么樣的變化?
A6:本產品由不溶性膠原蛋白制成,因此不易溶解。在體內情況下,它會在MMP中溶解。雖然該產品不適合

A6:移植,但有報道稱該產品用于體內實驗。 根據報告,膠原在8周后從活體中移除。移植膠原被認為將可以

A6:取代移植細胞的胞外基質,直到其消失。


Q7:我們可以用手術刀手動切割膠原片到更小的尺寸嗎? 在切割過程中和切割后會造成膠原片/結構/完整性的

Q7:破壞/扭曲/分散嗎?
A7:你可以切割膠原板,但如果你使用鈍刀,孔結構可能會皺起來。


Q8:細胞會以多大強度/完好地吸附到膠原海綿? 即使在強烈攪拌后細胞能否容易分離?
A8:即使在強烈攪拌后,一旦細胞附著,也不容易分離,除非低粘附性細胞。


Q9:我們如何能夠以最小損傷從膠原海綿中分離細胞?
A9:請使用膠原酶分離膠原。

◆膠原,可滲透膜


Q1:膜是否耐熱? 它能承受的最高溫度是多少? 當溫度升高到高于體溫的溫度時,它會降解嗎?
A1:我們沒有測量這種產品的耐熱性。以下信息供您參考,由于液體膠原變性在40°C左右,海綿型膠原可能不會

A1:變性,除非達到更高的溫度。


Q2:膜的彈性是什么? 它會容易撕裂嗎? 它能承受多少重量? 最重要的是,在處理膜時,我們應該注意哪些?
A2:我們沒有測試這種產品的彈性。然而,它會容易撕裂,因為這種產品被再加工成薄膜形式。


Q3:它是否適合移植,例如皮膚移植用于傷口愈合?
A3:是的。


Q4:滲透膜會溶解嗎? 他們如何溶解? 它需要多長時間才能使它們完全溶解,特別是移植(皮膚細胞)到動物

Q4:模型后? 當膠原溶解時,培養的細胞會發生哪些變化?
A4:我們認為可透膜在移植后約一個月會溶解。


Q5:我們可以用手術刀手動切割膜到更小的尺寸嗎? 它會在切割過程中和切割后引起膜結構/完整性的破壞/變

Q5:形/分散嗎?
A5:是的,你可以將膜切成更小的尺寸。


Q6:細胞粘附/附著到可滲透膜上的強度/完整性是什么樣的,特別是當我們在膜的雙面上進行兩種不同細胞類型

Q6:的夾心培養時? 即使在強烈攪拌后細胞是否容易分離?
A6:即使在強烈攪拌后,一旦它們附著,細胞也不容易分離,除非低粘附性細胞。


Q7:我們如何能夠從雙側膜以最小的損傷分離細胞?
A7:請用刮刀或膠原酶回收細胞。


Q8:如何在膜的兩個不同表面上觀察兩種不同的細胞類型? 我們用鑷子翻轉? 這種行為是否會造成細胞損傷或

Q8:脫落?
A8:您可以通過相差顯微鏡觀察細胞。然而,難以區分細胞接種于哪一側。因此,更好的方法是用熒光素標記細

A8:胞并通過熒光顯微鏡觀察。


Q9:可以將膜從50mm培養皿,6孔和24孔培養板上分離下來嗎?
A9:可用刀把它分開。

◆膠原,蜂窩海綿


Q1:如何確保培養的細胞粘附在蜂窩海綿上? 我們可以在顯微鏡下觀察嗎?
A1:相差顯微鏡能夠觀察。


Q2:蜂窩海綿是否耐熱? 它能承受的最高溫度是多少? 當溫度升高到高于體溫的溫度時,它會降解嗎?
A2:我們沒有測量這種產品的耐熱性。以下信息供您參考,由于液體膠原變性在40°C左右,海綿型膠原可能

A2:不會變性,除非達到更高的溫度。


Q3:蜂窩海綿的耐久性是什么? 它能承受多少重量?
A3:我們沒有測試這種產品的彈性。然而,它會被負載打破,因為這種產品是凍干低濃度膠原。


Q4:蜂窩海綿會溶解嗎? 他們如何溶解? 它需要多長時間才能使它們完全溶解,特別是移植(如皮膚細胞)

Q4:到/入動物模型后? 當蜂窩海綿溶解時,培養細胞會發生哪些變化?
A4:移植后約一個月,海綿會溶解。


Q5:我們可以用手術刀手動切割蜂窩海綿到更小的尺寸(更薄)嗎? 在切割過程中和切割后,是否會導致海

Q5:綿結構的破壞/變形/分散?
A5:你可以切割膠原板,但如果你使用鈍刀,孔結構可能會皺起來。


Q6:細胞粘附/附著到蜂窩海綿上的強度/完整性如何?即使在強烈攪拌后細胞是否容易分離?
A6:即使在強烈攪拌后,一旦它們附著,細胞也不容易分離,除非低粘附性細胞。


Q7:可以通過膠原酶處理,簡便地收獲細胞。處理后會影響細胞活力嗎?有何處理方案?
A7:請加膠原酶至終濃度為0.1%,溶解約30分鐘。如果你擔心細胞損傷,提高膠原酶濃度和減少處理時間。


◆羊毛脂海綿(MIGHTY)


Q1:MIGHTY海綿是否耐熱? 它能承受的最高溫度是多少? 當溫度升高,例如高于體溫時,它會降解嗎?
A1:我們沒有測量這種產品的耐熱性。以下信息供您參考,由于液體膠原變性在40°C左右,海綿型膠原可能

A1:不會變性,除非達到更高的溫度。


Q2:MIGHTY海綿會溶解嗎? 他們如何溶解? 它需要多長時間才能使它們完全溶解,特別是移植(如皮膚細

Q2:胞)到/入動物模型后? 當MIGHTY溶解時,培養的細胞會發生哪些變化?
A2:因為MIGHTY海綿是高強度海綿,它難以溶解。有一個數據表明MIGHTY海綿移植后至少3個月內不會溶解。


Q3:我們可以用手術刀手動切割MIGHTY海綿到更小的尺寸嗎? 在切割過程中和切割之后,是否會導致MIGHTY

Q3:結構的破裂/變形/分散? 在切割過程中是否有任何的推薦步驟或預防措施?
A3:當它是膨脹狀態,你可以切割MIGHTY海綿。然而,刀切割海綿后,可能會有切口,因為這是一種高強度的海綿。


Q4:細胞粘附/附著到MIGHTY海綿上的強度/完整性?即使在強烈攪拌后細胞也能很容易分離嗎?
A4:即使在強烈攪拌后,一旦它們附著,細胞也不容易分離,除非低粘附性細胞。


Q5:我們如何將細胞以最小損傷從MIGHTY海綿中分離?
A5:因為MIGHTY海綿是高強度的,所以難以從海綿中回收活細胞。另一方面,在均質化之后回收核苷酸或蛋白質

A5:是可行的。


◆膠原微球


Q1:微球膠原蛋白的上清液/溶液是什么?
A1:PBS


Q2:如何確保培養的細胞粘附到微球? 我們可以在顯微鏡下觀察嗎?
A2:你可以通過相差顯微鏡觀察。


◆膠原涂層B-TCP(B-磷酸鈣)支架


Q1:這個支架的厚度是多少?
A1:1.0±0.1 mm


Q2:支架是否耐熱? 它能承受的最高溫度是多少?當溫度升高,例如高于體溫時,它會降解嗎?
A2:β-TCP支架可以耐高溫,但是涂覆的膠原在40℃左右變性。


Q3:支架的彈性如何? 它會容易撕裂/破裂嗎? 它能承受多少重量? 最重要的是,在處理膠原時,我們應該注

Q3:意哪些?
A3:我們沒有測試這種產品的彈性。然而,我們認為支架是來自β-TCP,它可以承受一定負載。


Q4:它適合移植嗎?
A4:是。 但本產品設計用于骨形成測定。


Q5:支架會溶解嗎? 他們如何溶解? 需要多長時間才能使它們完全溶解,特別是移植到動物模型之后? 當支架

Q5:溶解時,培養的細胞會發生哪些變化?
A5:很難溶解,因為這個產品是由β-TCP組成。


Q6:我們可以用手術刀手動切割支架到更小的尺寸嗎? 在切割過程中和切割后會引起支架結構的破壞/變形/分散

Q6:嗎?
A6:很難切割,因為這個產品是由β-TCP組成。


Q7:細胞粘附/附著到支架上的強度/完整性如何?即使在強烈攪拌后細胞是否容易分離?
A7:即使在強烈攪拌后,一旦細胞附著,也不容易分離,除非低粘附性細胞。


Q8:我們如何能夠以最小的損害從支架上分離細胞?
A8:請使用膠原酶分離膠原。

Atelocollagen, Honeycomb sponge

Product number : KOU-CSH-10, KOU-CSH-96


<References>

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     cellscultured in honeycomb-like type-I collagen matrix. Amino Acids. (2012) Feb;42(2-3):565-75.

2.  Ishii I, et al. Histological and functional analysis  of vascular smooth muscle cells in a novel  culture

     system with honeycomb-like structure. At herosclerosis. (2001) Oct;158(2):377-84.

3.  Mariko Yamaki: in vitro and de novo generation of hair from mosaic spheres formed jointly from ES

     and  mesenchymal  cells.  The  Japanese  Society  for  Regenerative  Medicine magazine.  (2009)

     8(2):91-97.

4.  Mariko  Yamaki:  Artificial  extracellular  matrix  of  type  I  collagen  can  suppress the tumorigenetic

     potential  of  mouse  embryonic  stem  cells.  The  Japanese  Society  for  Regenerative  Medicine

     magazine. (2009) 8(1):109-114.

5.  Suzuki  T,  et  al.  Growth  inhibition  and  differentiation  of  cultured  smooth  muscle  cells  depend 

     on cellular crossbridges across the tubular lumen of type I collagen matrix honeycombs. (2009)

     Microvasc Res. 77(2):143-149.

6.  Fukui N, et al. Bone tissue reaction of nano-hydroxyapatite/collagen composite at the early stage of

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     collagen scaffold. (2008) J Biomed Mater Res A. 84(1):191-197.

9.  Saeki K, et al. Highly efficient and feeder-free production of subculturable vascular endothelial  cells

     from primate embryonic stem cells.(2008) J Cell Physiol. 217(1):261-280

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     pathway and stimulates the growth of chondrocytes in three-dimensional cultures: a basic science

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12.Rodriguez  AP,  Missana  L,  Nagatsuka  H,  et  al.:  Efficacy  of  atelocollagen  honeycomb  scaffold 

     in bone formation using KUSA/A1 cells. J Biomed Mater Res A. (2006) 77(4):707-717.

13.George J, et al. Differentiation of mesenchymal stem cells into osteoblasts on honeycomb collagen

     scaffolds. (2006) Biotechnol Bioeng. 95(3):404-411.

14.Imamura  T,  et  al.  Embryonic  stem  cell-derived  embryoid  bodies  in  three-dimensional  culture

     system form hepatocyte-like cells in vitro and in vivo. (2004) Tissue Eng. 10(11-12):1716-1724.

15.Itoh H, et al. A honeycomb collagen carrier for cell culture as a tissue engineering scaffold.(2001) Artif

     Organs. 25(3):213-217.

16.Moriyama  T,  et  al.  Development  of  composite  cultured  oral  mucosa  utilizing  collagen  sponge

     matrix and contracted collagen gel: a preliminary study for clinical applications. (2001) Tissue Eng.7(4):

     415-427.